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將凍存管放置于凍存盒中進(jìn)行細(xì)胞凍存是經(jīng)濟(jì)有效的
更新時(shí)間:2019-10-21  |  點(diǎn)擊率:1881
    隨著細(xì)胞被冷凍至冰點(diǎn)以下,懸液中冰晶和溶質(zhì)的濃度有所增加。如果冷卻過(guò)程中,胞內(nèi)水分可以滲出細(xì)胞,則可以減少胞內(nèi)冰晶。通常1℃/min的降溫速度可以促進(jìn)此過(guò)程。但是,水分的喪失會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞收縮,當(dāng)這種收縮達(dá)到一定程度,又會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活性的劇烈下降。冷凍保護(hù)劑,如甘油或者二甲基亞砜(DMSO),可以緩解這種效應(yīng)。細(xì)胞凍存的標(biāo)準(zhǔn)程序是在含有冷凍保護(hù)劑的培養(yǎng)基中,將細(xì)胞緩慢冷凍至–70℃,然后將凍存管轉(zhuǎn)移到液氮中以保持低于–130℃的環(huán)境。

    有很多方法可以實(shí)現(xiàn)1℃/min的降溫速度。電腦控制的可編程電子降溫系統(tǒng)是較好的方式,可以保持降溫速度。但這種設(shè)備價(jià)格較高,僅當(dāng)對(duì)凍存非常敏感的細(xì)胞時(shí)才有必要使用。

    比較經(jīng)濟(jì)的方式是將凍存管放置于凍存盒中,在低于–70℃的冰箱中凍存24小時(shí)。已有一些商業(yè)化凍存盒產(chǎn)品能夠非常接近1℃/min的理想降溫速度。或者可以將凍存管放置于壁厚大約15mm的1L容積的聚苯乙烯盒子中,并填充入紙、棉絨或者泡沫起到隔熱的作用。
    凍存管材質(zhì)分為兩種:玻璃或者塑料。玻璃管更難操作,但更適合珍貴細(xì)胞的長(zhǎng)期保存,而且一旦適當(dāng)密封,其安全性也更高。
    低溫凍存盒分為紙質(zhì)和PP材質(zhì),適用于放置0.5毫升、1.5毫升或者2.0毫升微型管和凍存管,紙質(zhì)凍存盒,覆膜防水,可反復(fù)凍融。滿(mǎn)足樣本儲(chǔ)存的需求。

 

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